
Josefine Preuß wuchs in Potsdam mit einer älteren Schwester auf. Als Kind spielte sie in der Potsdamer Theatergruppe Taifun und einige Kinderhauptrollen am Hans Otto Theater. Von 2000 bis 2003 war Preuß in der Kinderserie Schloss Einstein, die im KI.KA ausgestrahlt wird, als intrigant-zickige Anna Reichenbach zu sehen. Ihr Charakter entwickelte sich zu einer tragenden Rolle und machte sie populär. Im Februar 2006 kehrte sie für einige Folgen zurück. Später folgten diverse kleinere (unter anderem in Inspektor Rolle), aber auch größere (Jargo) Rollen. 2004 übernahm sie die Moderation des Kinderkanal-Journals Quergelesen, in dem sie Bücher für Kinder und Jugendliche vorstellte. Im selben Jahr spielte sie die Rolle der Nessie im ProSieben-Spielfilm Klassenfahrt – Geknutscht wird immer. 2005 verkörperte sie die Sophie in der ProSieben-Teeniekomödie Schüleraustausch – Die Französinnen kommen. Nach dem Abbruch der Schule besuchte Preuß die private Schauspielschule Die Etage in Berlin, brach diese im letzten Semester ab und drehte im Anschluss den Film Küss mich, Genosse!, in dem sie die Alexandra spielt. Im Herbst 2005 stand sie in Berlin für die erste Staffel der ARD-Vorabendserie Türkisch für Anfänger vor der Kamera. Nach Drehschluss der zweiten Staffel von Türkisch für Anfänger drehte sie in Prag für Dornröschen – Ab durch die Hecke, eine Episode aus der ProSieben Märchenstunde. Sie spielt darin die Hauptrolle. 2007 spielte sie die Hauptrolle in dem anspruchsvollen Kurzfilm Stühle im Schnee. Dieser handelt von einer Kindesvergewaltigung und erzählt die Geschichte der Flucht eines jungen Mädchens in die Welt der Phantasie, um der Realität ihrer Entführung und Vergewaltigung zu entrinnen. Im Sommer 2008 stand Preuß für weitere Folgen der Serie Türkisch für Anfänger vor der Kamera. Von Anfang April bis Anfang Juni 2011 stand Preuß mit ihren Serienkollegen für den Türkisch für Anfänger Kinofilm, unter anderem in Berlin, München und Thailand, vor der Kamera. Neben ihrer Arbeit für Film und Fernsehen lieh Josefine Preuß auch zahlreichen Hörbuchproduktionen ihre Stimme, darunter das Jugendhörbuch Siebenmeter für die Liebe von Dora Heldt, das im Frühjahr 2011 im Jumbo Verlag erschien. Josefine Preuß wohnt in Berlin. Am 25. Oktober 2012 erschien der Animationsfilm Hotel Transsilvanien in den Kinos, wo Josefine Preuß neben Elyas M’Barek einer der Hauptrollen ihre Stimme geliehen hat. Im Dreiteiler Das Adlon. Eine Familiensaga, welcher im Januar 2013 im ZDF ausgestrahlt wurde, verkörperte Preuß Sonja Schadt. 2012 übernahm sie in der Verfilmung von Rubinrot aus der Buchreihe Liebe geht durch alle Zeiten von Kerstin Gier die Rolle der Lucy Montrose.
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